血尿素測定的方法有二乙酰一肟法、酶偶聯(lián)速率法、脲酶波氏比色法、離子交換樹脂法、高效液相色譜法等。
1. 二乙酰一肟法:在酸性條件下,尿素與二乙酰一肟共熱,生成紅色的二嗪化合物,其顏色深淺與尿素含量成正比,通過比色測定可計(jì)算出血尿素的含量。該方法操作相對簡便,是臨床上常用的方法之一,具有一定的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,但可能會受到一些物質(zhì)的干擾。
2. 酶偶聯(lián)速率法:利用脲酶催化尿素水解生成氨和二氧化碳,氨在谷氨酸脫氫酶的作用下與α-酮戊二酸和還原型輔酶Ⅰ反應(yīng),生成谷氨酸和氧化型輔酶Ⅰ,通過監(jiān)測輔酶Ⅰ在340nm處吸光度的變化速率來測定尿素的含量。此方法特異性高,準(zhǔn)確性好,受干擾因素較少。
3. 脲酶波氏比色法:脲酶水解尿素產(chǎn)生氨,氨在堿性條件下與苯酚及次氯酸鈉反應(yīng)生成藍(lán)色的靛酚,根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色測定。該方法操作相對復(fù)雜一些,但其靈敏度較高。
4. 離子交換樹脂法:利用離子交換樹脂對尿素的選擇性吸附,然后通過洗脫、測定洗脫液中尿素的含量來確定血尿素的濃度。這種方法在特定情況下使用,操作要求較高。
5. 高效液相色譜法:通過高效液相色譜儀對血樣中的尿素進(jìn)行分離和定量分析。該方法具有高分辨率、高靈敏度和高準(zhǔn)確性的優(yōu)點(diǎn),但儀器設(shè)備昂貴,操作技術(shù)要求高,一般較少用于常規(guī)臨床檢測。
血尿素測定結(jié)果可能會受到多種因素影響,如飲食、藥物等。在檢測前應(yīng)保持正常飲食和作息,避免服用可能影響結(jié)果的藥物。若檢測結(jié)果異常,應(yīng)結(jié)合臨床癥狀和其他檢查進(jìn)一步明確診斷。